实时荧光定量PCR

 QPCR定义：所谓Real-Time PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。real-time PCR技术即实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物监测定量产生的偏差，提高实验的重复性。该技术已经被广泛用于监测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果。

Mx3005p大致使用流程：

1 打开电源，仪器自检；

2 打开电脑中Mx3005p软件，软件对话框中，选择实验类型；

3 放入样品，进入“Setup”中设定；

4 点击“Thermal profile setup”进行PCR程序设定；

5 “Setup”结束后，“点击Run”开始运行；

6 在运行过程中或运行结束后，可点击“Analysis”分析实验结果；

7 结果输出。

注意事项：

 1. 待程序完全退出后，才能关闭仪器及电脑。

2.  放入样品时要保证Tube完全放入到加热孔中。

3. 请确定使用的是符合要求的PCR。

4. 关上热盖时要能很轻松的推入把手，否则，请联系负责老师或相关负责人员。

5. 实验结束后请将PCR管拿出并自行保管好，并在仪器使用登记本上作好使用记录。 

QPCR的相关资料链接：

qPCR实验原理、流程及应用_百度文库

http://wenku.baidu.com/view/cdf7eee819e8b8f67c1cb970.html

Real-Time PCR实验流程_百度文库

http://wenku.baidu.com/view/3c5ab7bd960590c69ec37672.html